《飲料中香豆素類化合物的檢測》補充檢驗方法解讀

一、目的和依據(jù)

香豆素是主要豆香型香料之一，因具有香草氣味而常用于日用香精中。香豆素屬于苯丙素類化合物中的一種，是具有苯并α-吡喃酮母核結(jié)構(gòu)的一類化合物的總稱。毒理實驗發(fā)現(xiàn)，香豆素對小鼠胚胎有毒性，大鼠口服急性毒性LD50為293mg/kg；小鼠口服急性毒性LD50為196mg/kg。香豆素還會轉(zhuǎn)化為毒性物質(zhì)雙香豆素，會導(dǎo)致動物內(nèi)臟器官受損。由于合成香豆素的毒性大，我國、歐盟、美國等都禁止香豆素作為食品添加劑使用。

但各國對于香豆素類化合物的衍生物沒有相關(guān)限定，為了逃避監(jiān)管，不法分子可能將沒有檢測方法的香豆素類衍生物（如重要的香豆素衍生物7-甲基香豆素、7-甲氧基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、環(huán)香豆素、3,3'-羰基雙(7-二乙胺香豆素)、醋硝香豆素）等添加到食品中去。雖然二氫香豆素在GB 2760-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定為允許使用的食品用合成香料，但二氫香豆素可導(dǎo)致過敏反應(yīng)，《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中該物質(zhì)在化妝品中禁止使用，因此也加到該檢測方法中作為方法儲備。

我國目前現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)方法中僅有針對出口食品中香豆素、6-甲基香豆素、二氫香豆素、7-甲氧基香豆素、醋硝香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素含量的測定方法，且飲料（含酒精飲料）中的測定低限為0.05mg/kg，無法滿足摻假打假監(jiān)測要求，為了保障人民健康，急需建立飲料中香豆素、7-甲氧基香豆素、二氫香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、醋硝香豆素、環(huán)香豆素、3,3'-羰基雙(7-二乙胺香豆素)同時測定方法，為國內(nèi)食品安全和出口食品國際貿(mào)易提供技術(shù)支撐，為準(zhǔn)確評估食品風(fēng)險提供可靠的檢測技術(shù)。

二、在食品監(jiān)管中的研究性或監(jiān)測性應(yīng)用

《飲料中香豆素類化合物的檢測》適用于各種液體飲料和固體飲料中對香豆素、7-甲氧基香豆素、二氫香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、醋硝香豆素、環(huán)香豆素、3,3'-羰基雙(7-二乙胺香豆素)8種化合物含量的測定。該補充方法有效填補了飲料中多種香豆素類衍生物的檢驗標(biāo)準(zhǔn)空白，為國內(nèi)食品安全和出口食品國際貿(mào)易提供技術(shù)支撐，為準(zhǔn)確評估食品風(fēng)險、打擊摻雜不法行為提供可靠的檢測技術(shù)，同時也有助于在香豆素類衍生物的風(fēng)險監(jiān)測、案件調(diào)查和應(yīng)急處置等工作中，作為執(zhí)法的依據(jù)和參考。

三、先進性或創(chuàng)新性

本標(biāo)準(zhǔn)采用乙腈提取樣品中的香豆素8種化合物，經(jīng)低溫高速離心分層后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，采用多反應(yīng)離子監(jiān)測模式（MRM），以保留時間和定性離子碎片的豐度比定性，外標(biāo)法定量。樣品前處理根據(jù)不同復(fù)雜基質(zhì)的飲料（乳飲料、碳酸飲料、果汁等）和固體飲料樣品的性質(zhì)，以及香豆素類8種化合物組分的性質(zhì)，對樣品的前處理進行了優(yōu)化，直接用乙腈進行提取，離心分層待測組分后測定，操作簡便、時間短、檢測成本也相對較低。

該方法提取待測物后采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，由于方法準(zhǔn)確、高效，且靈敏度較高，能夠確保檢測結(jié)果公正準(zhǔn)確，符合目前食品安全監(jiān)測所追求的高效快速的要求。該方法適用范圍廣，適用于不同類型的飲料和固體飲料，也補充了飲料中香豆素及其7種衍生物檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的空白。

四、操作注意事項

實驗操作中需要注意的要點如下：

1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的儲存條件與有效期：根據(jù)方法研制過程中對標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性的研究，標(biāo)準(zhǔn)儲備液4℃放置3個月，標(biāo)準(zhǔn)中間溶液4℃放置1個月，工作液需臨時現(xiàn)配。

2.部分植物飲料由于存在原料帶入的情況，因此若出現(xiàn)檢測結(jié)果較高時，需排除是否為內(nèi)源性物質(zhì)。

3.由于在方法研制過程中，部分濾膜對香豆素類衍生物具有吸附的作用，因此建議所選用濾膜應(yīng)采用標(biāo)準(zhǔn)溶液檢驗確認無吸附現(xiàn)象，方可使用。

4.由于GB 5009.284-2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中香蘭素、甲基香蘭素、乙基香蘭素和香豆素的測定》已經(jīng)發(fā)布，因此香豆素的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)參照國標(biāo)執(zhí)行。

（本文由中國檢驗檢疫科學(xué)研究院提供）

《中國質(zhì)量報》